현미경 및 비파괴 검사기 전문 (주)와이에스피

STELLARIS FALCON

FLIM 현미경

명확한 대조와 즉각적인 수명 이미징

STELLARIS FALCON(FAst Lifetime CONtrast)은 기능적 이미징의 미래입니다. 형광 수명의 힘을 활용하여 세포 생리학을 조사하고 살아있는 세포의 역학을 탐구합니다. STELLARIS FALCON은 FLIM(형광 수명 이미징)을 위한 완전히 통합된 솔루션이며, 살아있는 세포의 신속한 동역학 연구를 위해 비디오 속도의 수명 이미징 획득을 가능하게 합니다.

STELLARIS FALCON은 이미징에 새로운 차원의 대비를 추가하여 생체 감지 및 단백질 간 상호 작용 추적의 가능성을 열어줍니다. 이제 STELLARIS 시스템의 모든 양식에 대해 FLIM 정보를 사용할 수 있습니다 .

이제 다음을 수행할 수 있습니다.

  • FLIM-FRET(Förster Resonance Energy Transfer)을 통해 빠른 분자 상호작용을 추적하세요.
  • 바이오센서를 사용하여 대사 상태 및 미세환경의 변화를 감지합니다.
  • 여러 형광단을 분리하기 위해 수명 대비 적용
  • 최소한의 교육으로 FLIM 데이터 획득
고양이 눈의 조직학적 단면. 동시 스펙트럼(회색) 및 FLIM(컬러) 공초점 이미징을 통해 수명별 대비를 확인할 수 있습니다. STELLARIS FALCON 및 LAS X 소프트웨어를 사용한 획득 및 시각화.

EPAC mT2-dVenus FRET 센서를 발현하는 HeLa 세포의 갇힌 cAMP. UV 매개 cAMP 언케이징에 대한 EPAC 반응(중앙 영역). 4fps로 녹화된 동영상입니다. 이미지 크기: 256x256픽셀. 컬러 바 스케일(수명): ns.

FLIM-FRET를 이용한 분자 상호작용 추적

현대 연구에서는 분자가 어떻게 상호 작용하여 중요한 작업을 수행하는지 조사합니다. FLIM-FRET은 이러한 상호 작용을 탐구하는 최고의 표준입니다.

STELLARIS FALCON은 FLIM 장비의 새로운 속도 표준을 설정합니다.

이는 매우 역동적인 세포 이벤트에서 FRET를 가능하게 합니다. 일일 실험에서 FRET 데이터를 획득하고 해석할 수 있습니다.

바이오센서로 미묘하고 빠른 변화 모니터링

바이오센서는 대사 활동, 신호 메커니즘, pH 및 미세 환경 변화에 대한 강력한 보고자입니다.

STELLARIS FALCON은 막 전위 역학과 같은 초고속 이벤트에서도 형광 수명에 포함된 정보에 대한 액세스를 제공합니다. 이 정보는 STELLARIS 시스템 이 제공하는 스펙트럼 형광 강도 이미징 및 TauSense 모드를 보완합니다 .

트롬빈 활성화 펩타이드로 자극한 후 칼슘 진동. 개별 세포의 반응은 수명의 변화로 기록됩니다. 4pfs에 획득한 영화입니다. 이미지 크기: 256 x 256픽셀. 컬러 바 스케일(수명): ns.

비생리적 조건(pH 8.5)에서 포유류 세포의 자가형광. 신호는 NAD/NADH 내인성 풀의 변화와 상관관계가 있습니다. 산화 스트레스의 발달은 시간이 지남에 따라 형광 수명이 감소하는 것으로 해석됩니다. 원본 이미지 크기: 512 x 512 픽셀. 컬러 바 스케일(수명): ns.

보다 안정적이고 민감한 대사 이미징

자가형광은 기존 이미징에서 문제가 될 수 있습니다. STELLARIS FALCON은 이를 귀중한 정보로 바꿔줍니다. 이제 자가형광을 대사 상태, 세포 분화 및 암 발달에 대한 리포터로 변환할 수 있습니다.

또한 STELLARIS FALCON은 형광 라벨링이 비특이적이거나 생리적 조건을 파괴하는 경우가 많은 생체 조직에서 이미징 대비를 가능하게 합니다.

스펙트럼 옵션을 뛰어넘는 형광단 분리

형광 라벨링은 세포내 구조를 구별하는 표준 방법입니다. 스펙트럼 분리는 매우 강력하지만 방출 스펙트럼이 너무 가까우면 제한되는 경우도 있습니다.

STELLARIS FALCON을 사용하면 형광 수명 이미징의 잠재력을 최대한 활용하여 지수 피팅, 패턴 피팅 및 새로운 FLIM 페이저 분리 분석을 사용하여 여러 형광 프로브를 분리할 수 있습니다.

대화형 이미지: 수명 대비로 구별되는 세포골격 구조. Alexa Fluor 555(녹색)로 면역표지된 Vimentin과 Alexa Fluor 546(파란색)으로 면역표지된 튜불린. 형광단은 스펙트럼상 매우 유사하지만 형광 수명 정보를 사용하여 분리됩니다. 이미지 크기: 512 x 512 픽셀.

Alexa Fluor 555(녹색)가 포함된 용액에 있는 형광 구슬(자홍색)의 단일 채널 이미지. 형광 수명을 기반으로 한 형광단 분리는 16fps(상단), 27fps(비디오 속도, 중간), 83fps(초고속, 하단) 등 다양한 속도에서 가능합니다. 염료 분리에 수명 정보를 사용하는 것은 강도(회색조)보다 훨씬 더 유리합니다. 영화는 수명 구성 요소의 픽셀 단위 피팅을 보여줍니다. 프레임 크기: 512 x 64픽셀. 스케일 바: 10μm.

빠른 수명의 이미징을 위한 STELLARIS FALCON

STELLARIS FALCON 현미경은 FLIM의 속도 제한을 극복하고 빠른 수명 데이터의 문을 열어줍니다.

지금까지 FLIM의 기술적 제약으로 인해 빠른 공정의 형광 수명 데이터에서 추출된 기능 정보를 얻기가 어려웠습니다. FLIM 획득 속도는 공초점 강도를 기록하는 것보다 최소 10배 느렸습니다.

STELLARIS FALCON 빠른 수명 대비 이미징을 사용하면 적절한 속도로 세포의 동적 프로세스를 추적할 수 있습니다. 이러한 작업은 데이터 처리 및 분석을 위한 지능형 알고리즘과 함께 TCSPC(Time-Corlated Single Photon Counting)를 사용하여 시간을 측정하는 새로운 방법 덕분에 가능합니다.

Nature의 애플리케이션 노트: SP8 FALCON: 비디오 속도 공초점 FLIM을 가능하게 하는 형광 수명 이미징의 새로운 개념

올인원 다중 모드 이미징

FLIM과 다른 양식을 결합하는 것은 STELLARIS FALCON만큼 쉽지 않았습니다. 지금까지 연구자들은 복잡한 배선과 번거로운 파일 전송 작업을 처리해야 했습니다. STELLARIS FALCON을 사용하면 수명 정보를 표준 공초점 워크플로에 통합할 수 있습니다.

STELLARIS FALCON은 LAS X 획득 및 분석 소프트웨어에 완전히 통합되어 있습니다. FLIM을 동시에 4개의 스펙트럼 채널로 녹화할 수 있으며 최대 10개 채널을 순차적으로 녹화할 수 있습니다. STELLARIS FALCON을 사용하면 3D 스택, 저속 촬영 시퀀스, 대형 모자이크 타일링 형식의 수명 대비에 액세스할 수 있습니다.

LAS X NAVIGATOR를 사용하면 보기 영역을 최대 10,000배까지 확장할 수 있으므로 관심 영역을 식별하고 완전히 새로운 방식으로 샘플을 탐색하는 데 소요되는 귀중한 시간을 절약할 수 있습니다.

복잡한 샘플을 간단하게 수집합니다. 190메가픽셀을 포함하는 722개 타일의 고해상도 마우스 배아 모자이크 이미지. 색상으로 구분된 4가지 특징적인 형광 수명을 갖춘 FLIM 데이터입니다. 획득: 1:23 h. 분석: 1:00시
Alexa555-Phalloidin 및 H2B mCherry로 표지된 세포. FLIM 페이저를 사용하여 분리가 수행되었습니다. 페이저 플롯은 두 가지 분포를 명확하게 보여줍니다.

페이저를 사용한 간단한 수명 정의

FLIM 페이저를 사용하는 STELLARIS FALCON을 사용한 분석은 수명 구성 요소의 2D 시각화를 제공합니다. FLIM 페이저를 사용하면 미세 환경 변화를 추적하고 신호를 다중화 할 구성 요소를 선택하고 FRET 효율성을 확인할 수 있습니다.

클릭 한 번으로 필요한 결과를 얻을 수 있습니다.

LAS X 소프트웨어를 사용하면 클릭 한 번으로 일상적인 스펙트럼 이미징과 동일한 원리로 FLIM을 사용할 수 있습니다.

현미경 검사법을 보완적인 기술로 사용하더라도 필수 사항을 찾아 즉시 이미징을 시작할 수 있습니다.

보다 전문화된 기능은 워크플로로 액세스할 수 있으며 사용자의 편의를 위해 자동화가 가능합니다.

과학에 집중하기 위한 원클릭 철학: LAS X 소프트웨어로 제어되는 STELLARIS FALCON